揮發性脂肪酸（VFA）是厭氧消化過程的重要中間產物，甲烷菌主要利用VFA形成甲烷，只有少部分甲烷由CO2和H2生成。但CO2和H2的生成也經過高分子有機物形成VFA的中間過程。由此看來，形成甲烷的過程離不開VFA的形成，但是VFA在厭氧反應器中的積累能反映出甲烷菌的不活躍狀態或反應器操作條件的惡化，較高的VFA（例如乙酸）濃度對甲烷菌有抑制作用。因此在反應器運行中，出水VFA用作重要的控制指標。
在VFA測定中，常進行VFA總量測定，其單位以mmol/L或換算為按乙酸計，以單位mg/L表示。對VFA中各種低級脂肪酸（乙酸、丙酸）的分別定量分析也是重要的，有時常需要知道以COD表示的VFA的量（即VFA以單位mgCOD/L）表示，此時也需要知道VFA中各種有機酸的含量，因此它們換算為COD的換算系數是不同的。
VFA包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸以及它們的異構體。在運轉良好的高速厭氧反應器中，VFA中乙酸可占有很高的比例，但當反應器運行狀態不好時，丙、丁酸濃度會上升。

一、分析原理

厭氧處理中會產生大量的CO2，在反應器條件下（pH6～8之間），這些CO2主要以HCO3-形成存在。這是厭氧處理中最重要的pH緩沖物，由HCO3-或主要由HCO3-引起的堿度稱為碳酸氫鹽堿度。HCO3-產生緩沖能力的范圍約在pH6～7。如前所述，HCO3-可以通過滴定測定，但測定過程受到其它一些陰離子的干擾，其中發酵液中常含有的VFA的陰離子是影響碳酸氫鹽堿度的主要因素。為此，在荷蘭發展了碳酸氫鹽堿度和VFA同時進行測量的方法。其原理如下：
水樣先以0.1000mol/L的HCl標準溶液滴定至PH=3，在這一pH值下，所有HCO3-被轉化為H2CO3，VFA也幾乎地轉化為其非離子形式。此后，已被滴定至pH3的水樣在如圖所示的帶回流冷凝器的燒瓶中煮沸，所有轉化為H2CO3的HCO3-將分解為CO2和H2O，其中CO2由其中溢出，而VFA則因為有回流冷凝器而保留在水樣中。然后水樣以0.1000 mol/L的NaOH標準溶液滴定至pH6.5，在此pH下，所有的VFA和其他弱酸將被轉化為其離子形式。由使用的HCl和NaOH標準溶液的量，即可計算出碳酸鹽堿度和VFA的濃度。由此得到的結果更易于判斷水樣在厭氧條件下的緩沖能力。

二、儀器

1．250ml帶磨口燒瓶，250ml燒杯；
2．10ml半微量酸式滴定管；
3．10ml半微量堿式滴定管；
4．回流冷凝器；
5．自動電位滴定計；

三、試劑

1．無二氧化碳水
   用于制備標準溶液及稀釋用的蒸餾水或去離子水，臨用前煮沸15min，冷卻至室溫。PH值應大于6.0，電導率小于2μs/cm。
2．指示液
   稱取1g溶于100ml 95%乙醇中，用0.1mol氫氧化鈉標準溶液滴定至出現淡紅色為止。
3．甲基橙指示劑
   稱取0.1g甲基橙溶于100ml蒸餾水中。
4．碳酸鈉標準溶液（1/2 Na2CO3=0.0250 mol/L）
   稱取1.392g(于250℃烘干4h)的(Na2CO3)，溶于少量無二氧化碳水中，移入1000ml容量瓶中，用水稀釋至標線，搖勻。貯于聚乙烯瓶中，保存時間不要超過一周。
5．鹽酸標準溶液（0.0250 mol/L）
   用分度吸管吸取2.1 ml濃鹽酸(ρ=1.19g/ml)，并用蒸餾水稀釋至1000ml,此溶液濃度≈0.0250 mol/L。其準確濃度按下法標定：
   用無分度吸管吸取25.00 ml碳酸鈉標準溶液于250 ml錐形瓶中，加無二氧化碳水稀釋至約100ml，加入3滴甲基橙指示液，用鹽酸標準溶液滴定至由桔黃色剛變成桔紅色，記錄鹽酸標準液用量。按下式計算其準確度：
 C=0.0250×25.00/V  
式中，
   c--鹽酸標準溶液濃度（mol/L）；
   V--鹽酸標準溶液用量（ml）。
6．氫氧化鈉標準溶液（0.0250 mol/L）
稱取60g氫氧化鈉，溶于50ml水中，冷卻后移入聚乙烯細口瓶中，蓋緊瓶蓋靜置4d以上。然后吸取上層澄清溶液1.4ml，用水稀釋至1000ml，此溶液約為001mol/L。其精確濃度可用鄰苯二甲酸氫鉀標定，標定方法如下：
   取基準試劑級鄰苯二甲酸氫鉀在105℃-110℃烘干至恒重。精確稱取三份，每份約0.1g（稱準至0.0001g），分別置于250ml錐形瓶中，加入100ml水，稍加熱使之溶解。然后加入4滴指示劑，用氫氧化鈉標準溶液滴定至淡紅色不褪為止。記錄下氫氧化鈉標準溶液的用量（ml），并按下式計算其濃度：
C= =G×103/(204.22×V) 
式中，
   C--氫氧化鈉標準溶濃度（mol/L）；
   V--氫氧化鈉標準溶用量（ml）；
   G--鄰苯二甲酸氫鉀重量（g）；
   204.22--苯二甲酸氫鉀(KH4C8H4O4)摩爾質量(g/mol)。

四、操作步驟
  
按自動電位計說明書安裝、校正好電位計，以蒸餾水清洗電極。
用移液管吸取過濾后的水樣Vml（其中含有VFA的量不超過3mmol），加入250ml燒杯中。
將樣品水溫調制（25±2）℃，將盛有此樣品的250ml燒杯置于滴定臺上，投入長約1.5cm的磁力攪拌棒，打開攪拌開關并調置一定攪拌強度，小心將電極放入燒杯的液面下。
如果此樣品水樣的pH高于6.5，則準確調節至6.5。
然后在自動電位滴定計上滴定此水樣至pH3.0，消耗的0.1000mol/LHCl記作Zml。
將此水樣轉移至磨口錐形瓶中，加入沸石或玻璃珠少許，安裝好回流冷 凝器。打開冷卻水，加熱至沸騰并維持3min以上，撤離酒精燈并等待2min，將溶液移回250ml燒杯。
以NaOH標準溶液滴定至pH=6.5，消耗的NaOH標準溶液記作Bml。

五、結果計算

揮發酸（VFA）（mol/l）=(Z×Ca-B×Cb)×103/V
式中，
   Ca--標準HCl溶液的濃度（mol/L）；
   Cb--標準NaOH溶液的濃度（mol/L）。